TTV的检测方法
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时间:2006-03-07 15:29
目前,ttv检测的方法主要是pcr,也有人探索利用斑点杂交的方法,elisa方法尚未建立,是一个急待解决的问题。
在ttv的检测中pcr方法与斑点杂交方法比较,pcr方法的灵敏性远高于斑点杂交法,但是斑点杂交法的特异性要优于pcr。把二者结合起来不失为一个理想的方法,黄呈辉 等人作了这方面的尝试,他们用pcr结合斑点杂交检测血清中ttv dna取得了理想结果。利用pcr方法检测ttv dna应注意两个问题: ①引物的选择:从已有的资料显示,不同区段位于1847-2346区域,从该段序列分析结果显示,此区段上对保守,变异较少,是设计引物的较佳选择区域。为了提高检出率,减少漏检,**能设计不同区段引物进行扩增。 ②dna提取方法:已有的研究表明,利用常规提取ttv dna的方法漏检率很高,其原因可能与ttv是单链dna病毒(属微小病毒科)和ttv在感染者血清中滴度差别较大(2-3个数量级)有关。目前认为美国biotronics tech corp公司的stg试剂在ttv dna的提取中**。
ttv病毒是一个发现不到一年的新病毒,对ttv各方面研究也刚刚开始,目前对ttv的了解非常粗浅。对于ttv感染动物模型的建立,致病机理的探索,实用方便的临床诊断方法,治疗ttv感染药物的筛选和评价,以及ttv预防疫苗的研制等等,都是急待研究和探索的问题。